.cp_wz table {border-top: твердое тело 1px #ccc; border-left: твердое тело 1px #ccc; } .cp_wz таблица td {border-right: 1px solid #ccc; нижняя граница: сплошной 1px #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} .cp_wz table th {border-right: 1px solid #ccc; border-bottom: 1px solid #ccc; padding: 5px 0px 0px 5px;} \ n Молекулярный вес: 320,36 LY2811376 - первый перорально доступный непептидный ингибитор β-секретазы (BACE1) с IC50 239–249 нМ, который снижает секрецию Aβ с EC50 300 нМ. , продемонстрировали 10-кратную селективность в отношении ВАСЕ1 по сравнению с ВАСЕ2 и более чем 50-кратное ингибирование по сравнению с другими аспарагиновыми протеазами, включая катепсин D, пепсин или ренин. Фаза 1. \ n LY2811376 демонстрирует зависимое от концентрации ингибирование hBACE1 с IC50 239 и 249 нМ против небольшого синтетического пептида или более крупного химерного белкового субстрата, соответственно. Обработка LY2811376 приводит к зависимому от концентрации снижению секреции Aβ в клетках HEK293, сверхэкспрессирующих APP. LY2811376 ингибирует секрецию Aβ с EC50 ~ 100 нМ в первичных культурах нейронов трансгенной мыши PDAPP. Введение LY2811376 (дозы 10, 30 и 100 мг / кг) приводит к дозозависимому значительному снижению Aβ, а также sAPPβ и C99, проксимальных продуктов расщепления протеолиза APP BACE1 в модели патологии Aβ на мышах APPV717F. После обработки LY2811376 (5 мг / кг) в плазме наблюдается снижение Aβ1-x, при этом максимальное снижение на 85% наблюдается через 4–12 ч после введения дозы у гончих собак. Протокол (только для справки) Анализ киназы: [2]
|
Determination of enzymatic efficiency
|
The stock solution for each FRET peptide substrate is prepared at 30 mM in dimethylsulfoxide (DMSO). The huBACE1:Fc muBACE1:Fc preparation is concentrated through YM10 Centricon. to a final concentration of at least 7 mg/mL. The optimal enzyme concentration for each FRET peptide substrate is determined individually at 30μM FRET peptide substrate in 50 mM ammonium acetate, pH 4.6, 1 mg/mL BSA and 1 mM Triton X-100. The enzymatic efficiency (kcat /Km) of either of the BACE1 orthologs toward individual FRET peptide substrates at 15, 30 and 100μM is determined under the optimal conditions for each substrate. The progress of the reaction is monitored by measuring an increase of the emission signal at 420 nm with excitation wavelength set at 320 nm, using a GEMINI fluorescence plate reader. Amino acid conjugated aminobenzoate is used to convert the emission signal in the relative fluorescence units into the molar concentration of product generated in the reaction mixture. The initial phase of the timedependence curve is fitted with a linear function whose slope is used to calculate the initial rate for huBACE1:Fc toward each peptide substrate. The kcat /Km values are calculated from the linear dependence of the initial rate on the concentration of each peptide.
|
Клеточный анализ: [1]
|
Cell lines
|
APP-overexpressing HEK293.
|
|
Concentrations
|
~ 100 μM
|
|
Incubation Time
|
48–72 hours
|
|
Method
|
The cytotoxicity in the HEK293Swe cell model is assessed using a CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay.
|
Исследование на животных: [1]
|
Animal Models
|
PDAPP transgenic mice.
|
|
Formulation
|
In 7% Pharmasolve
|
|
Dosages
|
10, 30, and 100 mg/kg doses
|
|
Administration
|
P.O.
|
|
Solubility
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol,
30 mg/mL
|
|
* Please note that Selleck tests the solubility of all compounds in-house, and the actual solubility may differ slightly from published values. This is normal and is due to slight batch-to-batch variations.
|
Конверсия различных модельных животных на основе BSA (значение на основе данных из проекта рекомендаций FDA)
|
Species
|
Baboon
|
Dog
|
Monkey
|
Rabbit
|
Guinea pig
|
Rat
|
Hamster
|
Mouse
|
|
Weight (kg)
|
12
|
10
|
3
|
1.8
|
0.4
|
0.15
|
0.08
|
0.02
|
|
Body Surface Area (m2)
|
0.6
|
0.5
|
0.24
|
0.15
|
0.05
|
0.025
|
0.02
|
0.007
|
|
Km factor
|
20
|
20
|
12
|
12
|
8
|
6
|
5
|
3
|
|
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by
|
Animal B Km
|
|
Animal A Km
|
Например, чтобы изменить дозу ресвератрола, используемую для мыши (22,4 мг / кг), на дозу, основанную на BSA для крысы, умножьте 22,4 мг / кг на коэффициент Km для мыши, а затем разделите на коэффициент Km для крыса. Этот расчет дает эквивалентную дозу ресвератрола для крыс 11,2 мг / кг.
|
Rat dose (mg/kg) = mouse dose (22.4 mg/kg) ×
|
mouse Km(3)
|
= 11.2 mg/kg
|
|
rat Km(6)
|
Химическая информация
|
Molecular Weight (MW)
|
320.36
|
|
Formula
|
C15H14F2N4S
|
|
CAS No.
|
1194044-20-6
|
|
Storage
|
3 years -20℃Powder
|
|
6 months-80℃in solvent (DMSO, water, etc.)
|
|
Synonyms
|
|
|
Solubility (25°C) *
|
In vitro
|
DMSO
|
16 mg/mL
(49.94 mM)
|
|
Water
|
<1 mg/mL
(
|
|
Ethanol
|
64 mg/mL
(199.77 mM)
|
|
In vivo
|
30% PEG400/0.5% Tween80/5% propylene glycol
|
30 mg/mL
|
|
|
Chemical Name
|
(S)-4-(2,4-difluoro-5-(pyrimidin-5-yl)phenyl)-4-methyl-5,6-dihydro-4H-1,3-thiazin-2-amine
|
|
Stock Solution (1ml DMSO)
|
1mM
|
10mM
|
20mM
|
30mM
|
|
Mass(mg)
|
0.32036
|
3.2036
|
6.4072
|
9.6108
|
Группа Продуктов : Нейронная передача сигналов > BACE ингибитор
