PF-06463922

Биологическая активность PF-06463922 демонстрирует значительную клеточную активность против ALK и большой набор клинических мутаций ALK с IC50 в диапазоне от 0,2 нМ до 77 нМ. [1] PF-06463922 значительно ингибирует пролиферацию клеток и индуцирует апоптоз клеток НМРЛ человека HCC78, несущих слияния SLC34A2-ROS1, и клеток BaF3-CD74-ROS1, экспрессирующих CD74-ROS1 человека. PF-06463922 также проявляет сильную ингибирующую активность и индуцирует апоптоз в клетках NSCLC, содержащих либо немутантные слияния ALK, либо мутантные слияния ALK. У крыс PF-06463922 демонстрирует низкий плазменный клиренс, умеренный объем распределения, разумный период полувыведения, низкую склонность к опосредованному p-гликопротеином 1 оттоку и 100% биодоступность. In vivo, PF-06463922 демонстрирует циторедуктивную противоопухолевую эффективность в моделях ксенотрансплантатов NIH3T3, экспрессирующих человеческие CD74-ROS1 и Fig-ROS1 посредством ингибирования фосфорилирования ROS1 и нижестоящих сигнальных молекул, а также ингибирования белка клеточного цикла Cyclin D1 в опухолях. In vivo, PF-06463922 также демонстрирует выраженную противоопухолевую активность у мышей, несущих опухолевые ксенотрансплантаты, экспрессирующие EML4-ALK, EML4-ALK-L1196M, EML4-ALK-G1269A, EML4-ALK-G1202R или NPM-ALK. \ n Биохимические анализы киназ. Рекомбинантные человеческие белки киназного домена дикого типа и мутантные ALK (аминокислоты 1093–1411) производятся на месте с использованием бакуловирусной экспрессии, предварительно активируются посредством аутофосфорилирования с помощью MgATP и анализируются на активность киназы с использованием анализа сдвига микрофлюидной подвижности. Реакции содержали 1,3 нМ ALK дикого типа или 0,5 нМ мутантную ALK (подходящую для получения 15-20% фосфорилирования пептидного субстрата через 1 час реакции), 3 мкМ 5-FAM-KKSRGDYMTMQIG-CONH2), 5 мМ MgCl2 и Km уровень АТФ в 25 мМ Hepes, pH 7,1. \ n Кинетические и кристаллографические исследования показали, что ингибиторы являются АТФ-конкурентными. Значения Ki рассчитывают путем подбора преобразования (%) к уравнению конкурентного ингибирования. Фермент ROS1 анализируют, как описано выше для ALK, за исключением использования 0,25 нМ рекомбинантного каталитического домена ROS1 человека (аминокислоты 1883–2347). Селективность ингибитора киназ оценивают с использованием панели 206-киназ.

Группа Продуктов : Протеин тирозинкиназа > Ингибитор ALK